2012年1月，由LGR公司發(fā)明的專(zhuān)利Method For Analysis Of Isotopes In Bodily Fluids在美國(guó)獲得批準(zhǔn)。專(zhuān)利發(fā)明人Douglas Steven Baer及其伙伴創(chuàng)造性的應(yīng)用LGR水同位素分析儀912-0032，成功的測(cè)量了生物體細(xì)胞液中的氫氧同位素δ18O, δ17O和δ2H。該方法區(qū)別于傳統(tǒng)的同位素比質(zhì)譜儀法，不會(huì)在對(duì)樣品的前處理過(guò)程中產(chǎn)生分餾，同時(shí)，測(cè)量結(jié)果也不會(huì)受到細(xì)胞液中其他物質(zhì)的干擾。
其基本前處理方法如下：
將30~250 μL（典型為200 μL）的樣品加入到離心管中，加入5 mg ZnSO4，以8000rpm的轉(zhuǎn)速離心10 min，取10~75 μL上清液，然后直接用LGR水同位素分析儀（912-0032）進(jìn)行測(cè)定。加入ZnSO4是為了沉淀蛋白質(zhì)，原理是金屬離子對(duì)蛋白質(zhì)有親和作用，可以引發(fā)形成蛋白質(zhì)交聯(lián)，形成沉淀，也可用到其他金屬離子如（Ca / Al / Cu），陰離子一般用氯化物或者是硫酸根。同時(shí)，該專(zhuān)利中還提到，以前的一些分離蛋白質(zhì)的方法不適合用此設(shè)備，具體方法如下：
1、用鹽析來(lái)沉淀蛋白質(zhì)，鹽析去除效率只有90%，并不完全，并且高濃度的鹽本身對(duì)測(cè)試結(jié)果會(huì)有影響；
2、有一種稱(chēng)之為Cohn process的方法，通過(guò)加入乙醇或者其他有機(jī)溶劑（甲醇、丙酮、乙二醇、三氯乙酸、肼）來(lái)沉淀蛋白質(zhì)，乙醇的加入導(dǎo)致PH降低，蛋白質(zhì)被沉淀下來(lái)，但是乙醇或其他類(lèi)似有機(jī)溶劑中的H會(huì)與H2O中的H發(fā)生置換反應(yīng)，影響測(cè)定結(jié)果，這可能就是之前提到的為啥醇類(lèi)物質(zhì)對(duì)測(cè)定結(jié)果會(huì)有影響的原因；
3、通過(guò)有機(jī)聚合物來(lái)沉淀蛋白質(zhì)，該有機(jī)物通常是聚乙二醇，同上，同樣不適用；
4、通過(guò)加酸到樣品中，與蛋白中的氨基形成不溶性的鹽，但是酸化后形成的NH4+中的H同樣會(huì)與H2O發(fā)生置換反應(yīng)；
5、絮凝。通過(guò)加入藻酸鹽、角叉菜膠、單寧酸來(lái)去除蛋白質(zhì)，該方法產(chǎn)生的效應(yīng)與Cohn process一樣。
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